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Molecular weight estimation of esterase isoenzymes in closely related Drosophila Species (Diptera: Drosophilidae) in non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis

机译:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中亲缘关系密切的果蝇物种(双翅目:果蝇科)中酯酶同工酶的分子量估算

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摘要

Neste trabalho, um método que permite a estimativa do peso molecular de duas esterases conhecidas e intimamente relacionadas, encontradas em Drosophila mojavensis e sua espécie aparentada D. arizonae, é descrito. Este método é realizado utilizando a técnica de eletroforese em diferentes concentrações de gel e aplicando os princípios de Fergunson. As enzimas, denominadas EST-4 e EST-5, apresentaram pesos moleculares entre 81 e 91 kDa. Apesar de seus padrões diferenciados de expressão durante o ciclo de vida do inseto, elas demonstraram propriedades de enzimas codificadas por genes estruturais distintos, corroborando a hipótese de um evento de duplicação gênica recente que gerou ambas em D. mojavensis e D. arizonae, bem como em outras espécies do grupo repleta. O método proposto é simples e adequado para ser utilizado em estimativas preliminares de determinação de pesos moleculares de outras enzimas sem haver a necessidade de um procedimento prévio de purificação.
机译:在这项工作中,描述了一种方法,该方法可以估算在果蝇及其相关物种D. arizonae中发现的两种已知且密切相关的酯酶的分子量。该方法使用电泳技术在不同的凝胶浓度下并采用Fergunson原理进行。这些酶称为EST-4和EST-5,分子量在81至91 kDa之间。尽管在昆虫的生命周期中它们的表达方式不同,但它们展示了由不同结构基因编码的酶的特性,从而证实了最近的基因复制事件的假说,该事件在莫氏疟原虫和亚利桑那假单胞菌以及在其他物种中。所提出的方法简单并且适合用于初步估计中以确定其他酶的分子量,而无需先前的纯化程序。

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